前言
支氣管哮喘(bronchial asthma)，簡稱哮喘，是由于某些過敏因素（如吸入花粉、工業(yè)粉塵、進(jìn)食魚蝦等）及植物性神經(jīng)功能紊亂引起的以支氣管阻塞為特點(diǎn)的疾病。哮喘的特征是陣發(fā)性帶有哮鳴音的呼吸困難、咳嗽、咳痰，呈反復(fù)發(fā)作。一般春、秋季節(jié)發(fā)病率較高，20％患者有本病的家族史。有關(guān)哮喘發(fā)病機(jī)制的探索、新治療方法的評價(jià)、新藥研究與開發(fā)都主要依賴于動物實(shí)驗(yàn)。但是，動物自發(fā)形成的變應(yīng)性哮喘很少，因此，成功復(fù)制支氣管哮喘的動物模型是研究支氣管哮喘反復(fù)難愈的關(guān)鍵。
部分造模方法
使用動物：豚鼠
【造模機(jī)制】：
鄰苯二甲酸酐(phthalic anhydride, PA)是小分子化合物，屬半抗原物質(zhì)。半抗原不能刺激機(jī)體產(chǎn)生免疫反應(yīng)，需與蛋白結(jié)合成全抗原后才能發(fā)揮致敏作用。據(jù)此本實(shí)驗(yàn)制備了兩種不同載體的苯酐全抗原即PA-HSA和PA-BSA。實(shí)驗(yàn)用動物用PA-BSA致敏，而激發(fā)時(shí)選擇吸入HSA，無哮喘出現(xiàn)，證明BSA和HSA兩者無交叉免疫反應(yīng)。但吸入PA-HSA后出現(xiàn)了哮喘發(fā)作，說明PA與載體蛋白結(jié)合后具備了全抗原的特征而使機(jī)體致敏。用致敏的抗血清給正常動物注射使其被動致敏，并在相應(yīng)抗原吸入攻擊下同樣可誘發(fā)出哮喘
【造模方法】：
抗原制備選用豚鼠，體重250~300g，2~3月齡。30mg PA用1ml丙酮溶解后，加入4°C 2％的人血清清蛋白碳酸氫鈉（9％）溶液中，并在此溫度下攪拌1小時(shí)形成苯酐-人血清清蛋白結(jié)合物(PA-HSA)。同法制備苯酐-牛血清清蛋白結(jié)合物(PA-BSA)。
免疫注射將制備好的抗原與弗氏完全佐劑等量研磨或用兩支注射器對推，使之成油包水狀（佐劑包抗原）混合物備用。固定動物，每只于腹腔或后腿肌內(nèi)注射0.2~0.3ml（含蛋白4~6mg)，只使用PA-BSA弗氏完全佐劑注射。于注射3~8周后進(jìn)行抗原吸入激發(fā)試驗(yàn)。
抗原吸入激發(fā)及記錄方法使動物俯臥固定，以膠布環(huán)繞貼于胸部并以細(xì)線與傳感器及記錄儀連接。激發(fā)前先描記正常的呼吸運(yùn)動曲線。用1 : 100 HSA生理鹽水溶液霧化后使動物吸入1~3分鐘，觀察記錄30分鐘。
【造模特點(diǎn)】：
豚鼠吸入抗原后在1~10分鐘內(nèi)，動物一般表現(xiàn)為呼吸頻率加快，由發(fā)作前的100~120次/min增加到140~160次／min；呼吸幅度亦增大，同時(shí)可伴有咳嗽、噴嚨，重者呼吸極度費(fèi)力、掙扎，可有短暫窒息甚至死亡，發(fā)作一般持續(xù)30~50分鐘。
【模型評估和應(yīng)用】：
PA是重要的化工原料，也是一種職業(yè)性致喘物質(zhì)。PA導(dǎo)致的哮喘屬變應(yīng)性哮喘，患者體內(nèi)可測出特異性抗體，PA抗原吸入激發(fā)試驗(yàn)常呈現(xiàn)陽性。本模型的建立，為進(jìn)一步研究該病的病理變化提供了條件，同時(shí)可用于PA引起的職業(yè)性哮喘發(fā)生、發(fā)展及其防治的研究。
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