前言
前列腺癌(prostate carcinomas)是男性泌尿生殖系統(tǒng)最常見(jiàn)的腫瘤，具有病因復(fù)雜、發(fā)病部位隱蔽、潛伏期長(zhǎng)且病理表現(xiàn)多樣等特點(diǎn)。在美國(guó)，其發(fā)病率在腫瘤患者中占第1位，死亡率占第2位。我國(guó)尚無(wú)前列腺癌發(fā)病率和死亡率的精確統(tǒng)計(jì)資料，雖遠(yuǎn)不及歐美，但隨著我國(guó)人口老齡化和飲食結(jié)構(gòu)的改變，前列腺癌發(fā)病率有逐年增高的趨勢(shì)，且初診時(shí)已有30%~50％前列腺癌患者發(fā)生轉(zhuǎn)移。因此，對(duì)前列腺癌的研究具有非常重要的意義。動(dòng)物模型是進(jìn)一步研究前列腺癌的發(fā)病機(jī)制、腫瘤與宿主的關(guān)系、腫瘤侵襲與轉(zhuǎn)移過(guò)程和治療措施有效性的重要工具。目前，按照前列腺癌動(dòng)物模型建立的方法特點(diǎn)可分為自發(fā)和誘發(fā)模型、移植性模型、基因修飾模型等。主要?jiǎng)游锓N類是大鼠、小鼠和犬，近年來(lái)，遺傳工程小鼠模型發(fā)展很快。
部分造模方法
使用動(dòng)物：裸鼠
【造模機(jī)制】：
由于裸鼠的免疫缺陷，作為人體腫瘤異種移植的受體，移植后生長(zhǎng)良好，人類腫瘤在裸鼠移植瘤的形態(tài)和功能等特征與移植前基本相同，應(yīng)用人前列腺癌LNCaP細(xì)胞接種裸鼠，鼠間異體移植建立人前列腺癌裸鼠移植瘤模型。
【造模方法】：
BALB/c雄性裸鼠，鼠齡3~5周，體重l8~23g。人前列腺癌LNCaP細(xì)胞株。
將對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期的LNCaP細(xì)胞消化后收集，取少量細(xì)胞液，調(diào)整細(xì)胞濃度接近于1×109/ml。乙醚麻醉裸鼠，用1ml注射器吸取200µl的細(xì)胞液注射于裸鼠的腋窩處。逐日觀察移植部位以了解腫瘤生長(zhǎng)的潛伏期和生長(zhǎng)速度。待腫瘤長(zhǎng)至直徑約10mm時(shí)，將在皮下已經(jīng)生長(zhǎng)的腫瘤的實(shí)體瘤摘除，用手術(shù)刀切成兩部分，一部分甲醛固定后供作病理檢查，另一部分置于平皿內(nèi)，在F-12培養(yǎng)液中清洗，去除中間壞死部分的組織，同時(shí)剔除腫瘤組織周圍的肌肉和血管，選取邊緣活力旺盛的細(xì)胞，再切成約1mm3大小的等塊，用培養(yǎng)液洗3次，于裸鼠雙側(cè)前肢皮下分別置埋植入，進(jìn)行裸鼠異體移植和傳代，無(wú)菌條件下繼續(xù)飼養(yǎng)，待移植瘤長(zhǎng)至直徑8~10mm時(shí)進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。
模型檢測(cè) ①移植瘤生長(zhǎng)曲線：細(xì)胞接種10天后以及異體移植瘤在移植后第5天定期觀察腫瘤生長(zhǎng)速度，測(cè)量其長(zhǎng)(a)、寬(b)，然后按公式V=πab2/6計(jì)算腫瘤的體積。②腫瘤組織的病理學(xué)檢查：將10％甲醛溶液中固定的腫瘤塊進(jìn)行低溫石蠟包埋，組織切片后進(jìn)行常規(guī)蘇木精－伊紅(H&E)染色和免疫組化檢查。
【模型特點(diǎn)】：
將LNCaP細(xì)胞接種于裸鼠前肢皮下和瘤塊鼠間異體移植、傳代，其方法簡(jiǎn)便，裸鼠移植瘤成功率可達(dá)100%。
【模型的評(píng)估和應(yīng)用】：
移植性腫瘤模型的優(yōu)點(diǎn)在于成功率高，周期較短，腫瘤生長(zhǎng)速率一致，個(gè)體差異小，宿主生存時(shí)間和機(jī)體反應(yīng)相似，易于客觀判斷等。缺點(diǎn)在于與人體原發(fā)腫瘤存在差異，不能完全表現(xiàn)原發(fā)腫瘤生物學(xué)特性。較適合用于評(píng)價(jià)藥物療效的篩選和研究前列腺癌轉(zhuǎn)移機(jī)制等。
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