前言
妊娠28足周至不滿37足周之間終止者，稱為早產(chǎn)(premature birth)。此時(shí)娩出的新生兒稱早產(chǎn)兒，體重小于2500g，發(fā)育尚不夠成熟。常用的早產(chǎn)模型有大腸埃希菌致宮內(nèi)感染早產(chǎn)模型和脂多糖宮內(nèi)感染早產(chǎn)模型。妊娠不足28周、胎兒體重不足1000g而終止者稱流產(chǎn)(abortion)。流產(chǎn)發(fā)生于妊娠12周前者稱早期流產(chǎn)，發(fā)生在妊娠12周至不足28周者稱晚期流產(chǎn)。常用的流產(chǎn)動(dòng)物模型有藥物性流產(chǎn)、嗅隱亭致流產(chǎn)、腎虛流產(chǎn)及反復(fù)自然流產(chǎn)模型等。
宮內(nèi)感染是導(dǎo)致早產(chǎn)及早產(chǎn)兒疾病的主要原因之一。研究發(fā)現(xiàn)，發(fā)生早產(chǎn)者中74％有宮內(nèi)感染的組織學(xué)證據(jù)，有30％與宮內(nèi)細(xì)菌感染有關(guān)。將病菌或相關(guān)的致病因子接種于子宮內(nèi)或全身可引起早產(chǎn)。常用的早產(chǎn)模型有大腸埃希菌致宮內(nèi)感染早產(chǎn)模型和脂多糖宮內(nèi)感染早產(chǎn)模型。
部分造模方法
使用動(dòng)物：大鼠
【造模機(jī)制】：
大腸埃希菌菌液子宮角接種或腹腔注射可直接誘發(fā)宮內(nèi)感染致孕鼠早產(chǎn)，起因在于羊膜腔感染后，妊娠組織發(fā)生炎癥改變，伴隨其過(guò)程產(chǎn)生一系列促宮縮物質(zhì)，從而引發(fā)早產(chǎn)。
【造模方法】：
1.動(dòng)物 懷孕15天的Sprague-Dawley大鼠20只。
2.大腸埃希菌稀釋液的制備 于術(shù)前1天取大腸埃希菌菌種接種于培養(yǎng)基上，置37℃孵箱孵育過(guò)夜，手術(shù)當(dāng)天以無(wú)菌生理鹽水稀釋制備大腸埃希菌懸浮液，濃度為1.5~2×108CFU/ml (1濁度），細(xì)菌量通過(guò)比色計(jì)檢測(cè)，最終細(xì)菌濃度于稀釋后接種于培養(yǎng)基上鑒定。
3.子宮角接種手術(shù) 所有大鼠于孕15天，采用2％戊巴比妥鈉(40mg/kg)腹腔內(nèi)注射麻醉，然后消毒腹部皮膚，下腹作1.5cm正中切口，紗布吸干腹腔內(nèi)液體，找到左、右子宮角。采用2.5號(hào)皮試注射器分別于左、右子宮角進(jìn)針，將0.2ml大腸埃希菌懸浮液接種于感染組大鼠兩個(gè)胎囊之間，避免直接注入胎鼠，接種后用3.0號(hào)絲線縫合腹膜關(guān)閉腹腔，間斷縫合皮膚。術(shù)后置于清潔籠內(nèi)，常規(guī)喂養(yǎng)。
4.宮內(nèi)感染及早產(chǎn)的判定標(biāo)準(zhǔn) 各組大鼠分娩后取左、右子宮角及胎盤，予HE染色觀察病理變化。以子宮壁及胎盤內(nèi)血管充血、水腫，并見大量中性粒細(xì)胞浸潤(rùn)判斷為宮內(nèi)感染。早產(chǎn)判斷標(biāo)準(zhǔn)在接種后6天內(nèi)（孕21天之前）分娩為早產(chǎn)。
【模型特點(diǎn)】：
1.模型組子宮黏膜層及黏膜下層、胎盤內(nèi)均可見大量中性粒細(xì)胞浸潤(rùn)，提示為宮內(nèi)感染。
2.模型組大鼠分娩后，模型組早產(chǎn)孕鼠數(shù)、產(chǎn)子鼠數(shù)、死產(chǎn)數(shù)、平均活胎數(shù)與正常鼠分別比較，差別均無(wú)顯著性意義。
3.模型組發(fā)生早產(chǎn)率可達(dá)到70％，與正常鼠比較差別有顯著性意義。
4.宮內(nèi)感染致早產(chǎn)的危險(xiǎn)度分析 提示宮內(nèi)感染為導(dǎo)致早產(chǎn)的危險(xiǎn)因素，OR (odds ratio)值為21，說(shuō)明存在宮內(nèi)感染的懷孕大鼠發(fā)生早產(chǎn)的危險(xiǎn)性將增加21倍。
【模型的評(píng)估和應(yīng)用】：
大腸埃希菌是宮內(nèi)感染最常見的致病菌之一，大鼠子宮角接種大腸埃希菌能夠?qū)е旅黠@的炎癥反應(yīng)。模型組宮內(nèi)感染證據(jù)明確，早產(chǎn)發(fā)生率高達(dá)70％，所以本模型是成功的。需要注意的是，雖然大腸埃希菌是常見的致病菌，但其他的病原菌如革蘭陽(yáng)性菌、厭氧菌、支原體及解脲脲原體等也是宮內(nèi)感染的重要致病菌，而且某些患者的宮內(nèi)感染是混合感染導(dǎo)致的。另外，本模型模擬孕后期發(fā)生宮內(nèi)感染的過(guò)程，并不適合早期宮內(nèi)感染的相關(guān)研究。
參考文獻(xiàn)：
1.劉明珠，許麗綿．補(bǔ)腎健脾復(fù)方對(duì)流產(chǎn)大鼠蛻膜Fas/FasL表達(dá)干預(yù)的實(shí)驗(yàn)研究. 中醫(yī)研究，2012,25 (8):62-64
2.李暉，陳建設(shè). 清宮膠襄對(duì)藥物流產(chǎn)后大鼠血清E2及子宮NO,NOS水平的影響．中國(guó)實(shí)驗(yàn)方劑學(xué)雜志，2011, 17 (14):237-239
3.袁天明，俞惠民，李建平．細(xì)菌性宮內(nèi)感染致早產(chǎn)大鼠模型的建立．浙江醫(yī)學(xué)，2004,26 (4):275-276
4.蔣立輝，歸綏琪，李昆明，等．中藥對(duì)嗅隱亭致流產(chǎn)模型血清PRL的影響．生殖與避孕，2002,22(4):199- 202
5. Clark DA,Chaouat G,Arck PC,et al. Cytokine-dependent abortion in CBA×DBA/2 mice is mediated by the procoagulant fgl2 prothrombinase. J Immunol, 1998, 160 (2):545-549
6.Gåfvels M, Bjurulf E,Selstam G. Prolactin stimulates the expression of luteinizing hormone/chorionic gonadotropin receptor messenger ribonucleic acid in the ral corpus luteum and rescues early pregnancy from bromocriptine-induced abortion. Biol Reprod, 1992,47 (4):534-540
7.Gibbs RS,Romero R,Hillier SL,el al. A review of premature birth and subclinical infection. Am J Obstel Gynecol, 1992, 166 (5):1515-1528
8.Lin Y,Xie M,Chen Y,el al. Prelerm delivery induced by LPS in impregnated BALB/c and NOD/ SCID mice. J Reprod Immunol,2006, 71 (2):87-101
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