前言
白血病(leukemia)是造血組織的惡性增殖性疾病，其特點(diǎn)是骨髓及其他造血組織中大量無核細(xì)胞無限制增生，進(jìn)入外周血液，臨床表現(xiàn)以骨髓、脾、肝等造血器官中的白血病細(xì)胞惡性增生與腫大，并浸潤到全身各組織臟器中，伴有不同程度的貧血、出血、感染發(fā)熱以及骨骼疼痛。白血病的發(fā)病率和死亡率逐年增加，居35歲以下青少年惡性腫瘤的首位。因此，制備相應(yīng)的動(dòng)物模型對其研究具有重要的意義。絕大多數(shù)人類白血病可以用化學(xué)（如燒化劑）、物理（如電離輻射）、生物（如反轉(zhuǎn)錄病毒）以及轉(zhuǎn)基因方法，在不同動(dòng)物（小鼠、豚鼠、大鼠、貓、牛、長臂猿等）中誘發(fā)白血病，建立動(dòng)物模型。
移植性白血病模型通常是選用動(dòng)物或人源性白血病細(xì)胞株移植入同種或免疫缺陷動(dòng)物體內(nèi)，經(jīng)傳代后生長特性已趨穩(wěn)定，并能在受體動(dòng)物中繼續(xù)傳代的一類模型。
部分造模方法
使用動(dòng)物：小鼠
【造模機(jī)制】：
Nalm-6是人急性B淋巴細(xì)胞系白血病細(xì)胞株，在普通的RMPI 1640培養(yǎng)基中容易生長，繁殖快，惡性度高，能引起彌散性疾病，可移植入裸鼠或SCID小鼠，模擬該疾病的發(fā)生發(fā)展。
【造模方法】：
用無菌PBS液將環(huán)磷酰胺濃度調(diào)整到10mg/ml，腹腔注射環(huán)磷酰胺2mg/只，連續(xù)注射2天；24小時(shí)后收集處于對數(shù)生長期的Nalm-6細(xì)胞，1000r/min離心5分鐘后，懸浮于無菌PBS中，調(diào)整細(xì)胞密度至2.5×107個(gè)/ml。BALB/c-nu/nu小鼠，5周齡，雌性，尾靜脈注射5×106個(gè)/只(200µl)；每隔1~2天觀察小鼠癥狀，以后肢出現(xiàn)癱瘓為發(fā)病標(biāo)準(zhǔn)。
【模型特點(diǎn)】：
一般在注射腫瘤細(xì)胞19天后出現(xiàn)肢行動(dòng)遲緩，并迅速發(fā)展為雙后肢癱瘓，隨著病情進(jìn)展，小鼠嚴(yán)重消瘦，并伴有脊柱側(cè)彎、弓背，呈惡病質(zhì)，直至死亡，平均死亡時(shí)間25天。與正常小鼠組織切片相比，白血病小鼠的肝、脾、腎、腦 膜、腦實(shí)質(zhì)、卵巢、肺都有腫瘤細(xì)胞浸潤，細(xì)胞呈團(tuán)塊狀生長，形成結(jié)節(jié)，有的呈彌漫性生長，其中以肝、脾、腦膜、腦實(shí)質(zhì)浸潤最明顯，小鼠部分肝脾組織出現(xiàn)壞死，但心肌、胃、小腸、結(jié)腸黏膜下層未發(fā)現(xiàn)腫瘤細(xì)胞。
【模型的評估和應(yīng)用】：
①制備該模型時(shí)宜選用5周齡BALB/c-nu/nu小鼠或SCID小鼠，隨著小鼠周齡的增加，腫瘤形成率明顯下降，而且器官浸潤陽性率也明顯下降。②尾靜脈注射細(xì)胞量應(yīng)控制在1×106~5×106個(gè)Nalm-6，通常發(fā)病在20~36天，模型建立成功率可達(dá)100%，注射細(xì)胞數(shù)目過多會(huì)導(dǎo)致細(xì)胞進(jìn)入小鼠體內(nèi)后生長繁殖較快，導(dǎo)致小鼠發(fā)病太早，病程過短而不宜觀察。③選擇恰當(dāng)?shù)腘alm-6細(xì)胞注射量和準(zhǔn)確的動(dòng)物周齡，可成功制備急性B淋巴細(xì)胞白血病動(dòng)物模型，該模型可準(zhǔn)確地模擬人急性B淋巴細(xì)胞白血病的病程發(fā)展和轉(zhuǎn)歸。④目前該模型主要用于急性B淋巴細(xì)胞白血病的靶向治療。
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