前言
腎小球疾病(glomerular diseases)是病因、發(fā)病機(jī)制、臨床表現(xiàn)、病理改變、病程和預(yù)后不盡相同的主要累及雙腎腎小球的一組疾病，可分為原發(fā)性、繼發(fā)性和遺傳性。多數(shù)腎小球腎炎是免疫介導(dǎo)性炎癥疾病。一般認(rèn)為，免疫機(jī)制是腎小球病的始發(fā)機(jī)制，腎小球疾病動(dòng)物模型在探討發(fā)病機(jī)制、病理過(guò)程以及臨床治療等方面發(fā)揮重要作用。本節(jié)主要介紹了系膜增殖性腎小球腎炎、Thy1系膜增生性腎炎、微小病變型腎病、IgA腎病以及腎小球硬化性腎病動(dòng)物模型的建立方法和特點(diǎn)。
lgA腎病(IgA nephropathy)是最常見(jiàn)的原發(fā)性腎小球疾病，其特點(diǎn)為腎活檢免疫病理學(xué)檢查在腎小球系膜區(qū)以IgA為主的免疫復(fù)合物沉積，同時(shí)存在系膜細(xì)胞增生，基質(zhì)增多。IgA腎病的發(fā)病機(jī)制尚未完全清楚，為此人們建立了許多l(xiāng)gA腎病動(dòng)物模型，用來(lái)揭示lgA腎病的發(fā)病機(jī)制。
部分造模方法
使用動(dòng)物：大鼠
【造模機(jī)制】：
BSA、脂多糖(lipopolysaccharides,LPS)和CCI4聯(lián)合應(yīng)用能夠造成胃腸道黏膜免疫功能紊亂，引起機(jī)體對(duì)血液和腎小球中的過(guò)量lgA清除障礙，導(dǎo)致腎小球系膜區(qū)以IgA為主的免疫復(fù)合物沉積，以及系膜細(xì)胞增生、基質(zhì)增多等病理改變，最終出現(xiàn)尿蛋白和尿血等lgA腎病的典型癥狀。
【造模方法】：
1.實(shí)驗(yàn)過(guò)程 雄性Sprague Dawley大鼠（體重220~260g)口服免疫原BSA (400mg/kg)，隔天灌胃，持續(xù)6周；皮下注射蓖麻油(0.5ml)和CCl4(0.1ml),1次／周，持續(xù)9周并聯(lián)合運(yùn)用LPS（分別于第6、8 周以0.05mg尾靜脈注射）。第10周末處死動(dòng)物，取血標(biāo)本和腎臟做相應(yīng)檢查。
2.指標(biāo)檢測(cè) 測(cè)定血清清蛋白、血清總蛋白、BUN、Cr、谷丙轉(zhuǎn)氨酶和谷草轉(zhuǎn)氨酶。另外，每隔三周檢測(cè)1次24小時(shí)尿蛋白和尿常規(guī)。腎臟病理切片進(jìn)行H&E和PAS染色，計(jì)數(shù)腎小球個(gè)數(shù)并計(jì)算腎小球系膜區(qū)占整個(gè)腎臟毛細(xì)血管叢面積的百分比，最后，對(duì)腎臟進(jìn)行IgA免疫熒光強(qiáng)度分級(jí)。
【模型特點(diǎn)】：
1.大鼠均出現(xiàn)蛋白尿，其中70％出現(xiàn)肉眼血尿，30％出現(xiàn)鏡下血尿，免疫熒光顯示腎組織．IgA 強(qiáng)度(2七3+），光鏡PAS染色顯示有彌漫性的輕中度系膜區(qū)增生，血清蛋白降低，但轉(zhuǎn)氨酶水平無(wú)變化。 2.在造模方法中，LPS是免疫佐劑，毒性較外
2.毒素葡萄球菌腸毒素弱，不易對(duì)動(dòng)物機(jī)體造成損害。將口服免疫原BSA的劑量為400mg/kg，隔日1次以及CC14以0.1ml劑最皮下注射盡可能減少對(duì)肝臟的損害。通過(guò)以上改良，模型組lgA在腎臟組織有較強(qiáng)沉積，操作起來(lái)更方便和安全，不易引起腹腔感染和動(dòng)物死亡，并且無(wú)明顯肝臟損害。
【模型評(píng)估和應(yīng)用】：
lgA腎病是最常見(jiàn)的原發(fā)性腎小球疾病，約占原發(fā)性腎小球疾病的1/3。采用復(fù)合改良法造模是目前l(fā)gA腎病中較為可靠穩(wěn)定、成功率高，且病理、臨床指標(biāo)接近人類(lèi)IgA腎病的動(dòng)物模型。它克服了口服免疫源＋肝臟切除＋免疫佐劑復(fù)合造模法動(dòng)物死亡率高（約50%）的缺點(diǎn)；葡萄球菌腸毒素＋口服免疫源＋免疫佐劑復(fù) 合造模法因葡萄球菌腸毒素是外毒素，毒性大，易引起機(jī)體損害；腹腔注射CC14引發(fā)的IgA腎病模 型，雖然有高強(qiáng)度的IgA沉積，但肝臟功能損害嚴(yán)重，常伴有肝細(xì)胞壞死、變性和假小葉生成。用啃齒類(lèi)動(dòng)物復(fù)制的IgA腎病模型，其血清IgA特性與人類(lèi)存在較大差別，故期望建立基因工程模型來(lái)克服其不足。
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