前言
角膜損傷根據(jù)層次的不同,可分為角膜內(nèi)皮的損傷和角膜上皮及基質(zhì)損傷。角膜內(nèi)皮的損傷可通過機(jī)械損傷法(針頭刺入前房對內(nèi)皮進(jìn)行刮除等)和穿透性角膜冷凍法等進(jìn)行復(fù)制。角膜上皮及基質(zhì)損傷也可以通過機(jī)械損傷法(切除家兔角膜板層及角膜緣的結(jié)膜及角膜緣上皮)或激光損傷來實(shí)現(xiàn)。以下主要介紹激光角膜損傷模型。
部分造模方法
使用動物:實(shí)驗(yàn)動物
【造模機(jī)制】:
眼是機(jī)體中對激光最為敏感、最易受損傷的靶器官。激光致眼損傷的部位主要為角膜及眼底視網(wǎng)膜,激光參數(shù)的不同會對損傷部位和程度造成很大影響。角膜是眼球最前面的一層薄膜,對于波長短于280nm的遠(yuǎn)紫外線吸收率接近100%,對于1900nm以上的中紅外和遠(yuǎn)紅外線角膜是全吸收體。因而,角膜易受紫外及中遠(yuǎn)紅外激光損傷。CO2激光的波長為10.6μm,為一種遠(yuǎn)紅外激光。生物組織對CO2激光的吸收系數(shù)很大,其生物作用機(jī)制主要是熱作用,當(dāng)?shù)湍茏钶敵觥⒍虝r間照射時,CO2激光能量的98%被角膜最初的40μm厚度所吸收,而且主要被富含水分的上皮細(xì)胞吸收,引起很小的熱擴(kuò)散,造成角膜損傷及瘢痕形成。
【造模方法】:
實(shí)驗(yàn)動物麻醉后,立即以CO2激光垂直照射角膜中央,光斑直徑5mm,每天2次氯霉素滴眼,裂隙燈顯微鏡觀察并持續(xù)2個月。
【模型特點(diǎn)】:
角膜損傷輕者出現(xiàn)白色或灰白色凝固斑,這種損傷是可逆的,愈后不留瘢痕;損傷較重者,可累及角膜基質(zhì)深層,愈后留瘢痕,遮擋瞳孔時影響視力;重度損傷者可造成角膜穿孔,引起失明。
【模型評估和應(yīng)用】:
家兔實(shí)驗(yàn)研究表明,在照射時間1秒、功率密度127W/cm2時,最終60%角膜出現(xiàn)穿孔,40%角膜出現(xiàn)瘢痕,瘢痕直徑6.8mm 左右,個別的有血管增生,瘢痕深達(dá)角膜全層。照射時間1秒,功率密度102W/cm2時,30天后全部角膜均出現(xiàn)瘢痕,瘢痕直徑6.4mm左右;相同功率密度照射0.5秒時,20天后全部出現(xiàn)瘢痕,瘢痕直徑5.7mm左右。功率密度62W/cm2,時間0.5秒,16天后全部出現(xiàn)瘢痕,瘢痕直徑5.3mm左右。因此, 認(rèn)為角膜瘢痕模型較合適的激光參數(shù)為能最密度30~100J/cm2,瘢痕形成時間為照后15~30天。在建立角膜損傷模型時,激光照射前角膜的暴露情況不同會造成角膜表面水含量不同,從而影響角膜損傷程度。
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參考文獻(xiàn):
1.邱培瑾.?角膜新生血管的動物模型.國外醫(yī)學(xué):眼科學(xué)分冊,2000, 24 (6):360-363
2.胡東東,王嘉容,楊在富.激光眼損傷動物校型研究進(jìn)展.軍事醫(yī)學(xué)科學(xué)院院刊,2010,5:489-491
3.聶愛芹,席苗,席興華,等單純疤疹病毒性角膜炎Ⅱ鼠模型的建立及鑒定國際眼科雜志,2012,12(11): 2059-2061
4.徐巖變應(yīng)性結(jié)膜炎動物模型眼科研究,2001, 19(2):181-183
5.魏瑞華,郝永娜,趙少貞.自身免疫相關(guān)性干眼動物模型的研究進(jìn)展.眼科新進(jìn)展,2012, 32 (7):690-693
6.Calonge MC, Pastor JC, Herreras JM, el al. Pharmacologic modulation of vascular permeability in ocular allergy in?the rat.?Invest Ophthalmol Vis Sci, 1990, 31 (1): 176-180
7.Marquart ME.Animal models of bacterial keratitis.J Biomed Biotechnol,2011,2011:680642
8.Pavan-Langston D. Herpes simplex virus ocular infections:current concepts of acute, latent and reactivated disease. Trans Am Ophthalmol Soc, 1990,88:727-796
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