前言
國(guó)人死因的1/4是癌癥，而癌癥死因的1/4是胃癌(gastric cancer)，在消化系統(tǒng)惡性腫瘤死亡病例中，約半數(shù)死于胃癌。胃癌起源于胃壁最表層的黏膜上皮細(xì)胞，可發(fā)生于胃的各個(gè)部位（胃竇幽門(mén)區(qū)最多、胃底賁門(mén)區(qū)次之、胃體部略少），可侵犯胃壁的不同深度和廣度。惡性腫瘤胃癌起源于胃壁最表層的黏膜上皮細(xì)胞，可發(fā)生于胃的各個(gè)部位（胃竇幽門(mén)區(qū)最多、胃底賁門(mén)區(qū)次之、胃體部略少），可侵犯胃壁的不同深度和廣度。癌灶局限在黏膜內(nèi)或黏膜下層的稱為早期胃癌，侵犯肌層以深或有轉(zhuǎn)移到胃以外區(qū)域者稱為進(jìn)展期胃癌。肉眼或胃鏡觀察胃癌有多種形態(tài)，如表淺型、腫塊型、潰瘍型、浸潤(rùn)型、潰瘍癌（為慢性胃潰瘍癌變）。顯微鏡放大觀察癌細(xì)胞有多種類(lèi)型（組織學(xué)分類(lèi)），如腺癌（占約90%，包括乳頭狀腺癌、管狀腺癌、黏液腺癌、印戒細(xì)胞癌）、腺鱗癌、鱗狀細(xì)胞癌、未分化癌、類(lèi)癌，更細(xì)微的癌細(xì)胞內(nèi)部的分子結(jié)構(gòu)也有很多差異，因此，雖都稱為胃癌，即使肉眼和顯微鏡下所見(jiàn)類(lèi)型是相同的，但個(gè)性仍有很大差異。
常見(jiàn)的胃癌動(dòng)物模型有誘發(fā)性胃癌動(dòng)物模型、人胃癌裸鼠原位接種模型及人胃癌裸鼠原位移植轉(zhuǎn)移模型。
部分造模方法
使用動(dòng)物：大鼠
【造模機(jī)制】：
常用甲基－硝基－亞硝基胍(N-methyl-N;-nitro-nitrosoguanidine,MNNG)和甲基膽蒽(methylcholanthrene,MC)。MNNG為多環(huán)碳?xì)浠衔?，有?qiáng)烈的致癌作用，還能使組織產(chǎn)生氧化氮而加重細(xì)胞惡性轉(zhuǎn)化。MC是強(qiáng)烈的直接致癌劑，不依賴于酶的代謝作用，直接作用于胃腸道黏膜，尤其口服對(duì)胃有較高的致癌特性。
【造模方法】：
MNNG誘發(fā)大鼠胃腺癌 選用Wistar雄性大鼠，體重100g,自由飲水，加入0.01％的MNNG (100µg/ml)，隔日一次，實(shí)驗(yàn)過(guò)程不再給予其他飲水。此外，還可用甲基亞硝基醋酸尿素給BD大鼠飲水中加2mg/kg體重，每周5次飲用，520天后全部大鼠均發(fā)生了胃腺癌。
MNNG誘發(fā)小鼠胃腺癌 選用昆明小鼠，體重18~22g，以500µg/ml MNNG溶液灌喂小鼠，3次／周，0.4ml/次，12個(gè)月后增至0.6ml。
MC誘發(fā)大鼠胃腺癌 選用Wistar大鼠，體重120~200g，無(wú)菌手術(shù)后，在腺胃黏膜面穿掛含MC的線結(jié)，含MC的線結(jié)是用普通細(xì)線在一端打結(jié)后，將一束線結(jié)置于盛有MC小玻璃試管內(nèi)，在乙醇燈上微微加熱，使MC液化滲入線結(jié)，MC濃度為50~100mg，每條線結(jié)合有MC約5mg，無(wú)菌條件下打開(kāi)腹腔，在腺胃前壁做長(zhǎng)為2~3mm的切口，縫針自切口進(jìn)入胃腔，然后從幽門(mén)小彎側(cè)黏膜向肌層和漿膜穿出并打結(jié)固定，術(shù)后禁食半天。
MC誘發(fā)小鼠胃癌 取20g左右小鼠，無(wú)菌手術(shù)下，在腺胃黏膜面穿掛含MC線結(jié)。含MC的線結(jié)是用普通細(xì)線，在一端打結(jié)后，將線結(jié)置于盛有MC小玻璃試管內(nèi)，在乙醇燈上微微加溫，使MC液化滲入線結(jié)。MC濃度為0.05~0.1g 20－甲基膽蒽內(nèi)浸入10~20根線。手術(shù)埋線后4~8個(gè)月可誘發(fā)成功胃癌。用不對(duì)稱亞硝胺，劑量為0.25ml/kg體重，3個(gè)月后全部動(dòng)物發(fā)生前胃乳頭狀癌，7～8個(gè)月后有85%~100％發(fā)生前胃癌。昆明種最敏感，A系次之，615系小鼠敏感性最差。
【模型特點(diǎn)】：
MNNG誘發(fā)大鼠胃癌的發(fā)生率為80％左右，以高分化腺癌為主，可發(fā)生肝和肩部淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移。MNNG誘發(fā)小鼠胃腺癌誘發(fā)率為23％，以高分化腺癌為主，可能同時(shí)誘發(fā)前胃癌和十二指腸腫瘤。MC可使全部動(dòng)物3個(gè)月后發(fā)生前胃乳頭狀癌，7～8個(gè)月發(fā)生胃腺癌，致癌率為85％~100％。
【模型的評(píng)估和應(yīng)用】：
利用藥物誘導(dǎo)劑誘導(dǎo)胃癌的發(fā)生是研究胃癌發(fā)病學(xué)機(jī)制的最有效方法，可以進(jìn)一步驗(yàn)證各種可疑的致癌、促癌因素，闡明胃癌的發(fā)病機(jī)制，探討抗癌藥物的作用機(jī)制并對(duì)其進(jìn)行篩選。化學(xué)致癌物質(zhì)誘發(fā)的胃癌適用于胃癌的病因?qū)W、病理過(guò)程、生物學(xué)行為、腫瘤免疫及抗腫瘤藥物的篩選。
不同的種屬、性別、年齡的動(dòng)物對(duì)致癌物的易感性有很大差異，直接影響誘癌率和造模時(shí)間。單因素誘變持續(xù)的時(shí)間長(zhǎng)，癌變率也較低，給藥方式、時(shí)間、藥物濃度等對(duì)成瘤率的影響很大。利用多因素誘發(fā)的大鼠胃癌模型與臨床癌前病變的發(fā)病機(jī) 制更接近，周期短，誘發(fā)率較高。但由于多因素聯(lián)合攻擊動(dòng)物的死亡率較高，實(shí)驗(yàn)時(shí)一定要小心操作，注意調(diào)整誘變劑如MNNG的濃度等。
參考文獻(xiàn)：
1.王寧，王斌，王雅杰．Avastin對(duì)胃癌裸鼠原位移植模型血管生成的影響癌癥，2006, 25 (9):1076-1081
2.孫永強(qiáng)，王強(qiáng)，鄭國(guó)靜，等. 羅非昔布對(duì)裸鼠人胃癌原位種植瘤組織中血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子和誘導(dǎo)型一氧化氮合酶表達(dá)的影響．第三軍醫(yī)大學(xué)學(xué)報(bào)，2007,29(10): 929-931
3.Bilici M, Cayir K, Tekin SB, et al. Effect of mirtazapine on MNNG-induced gastric adenocarcinoma in rats. Asian Pac J CancerPrev,2012, 13(10):4897-4900
4.Jantscheff P, Ziroli V, Esser N, el al. Anti-metastatic effects of liposomal gemcitabine in a human orthotopic LNCaP prostate cancer xenograft model. Clin Exp Metastasis, 2009, 26 (8):981-992
服務(wù)號(hào)二維碼.jpg)
