細胞樣本寄送要求
1、冷凍儲存運輸（凍存株）
干冰運輸凍存細胞。外地寄送時，干冰消耗量約為4-5kg/24h（根據(jù)溫度會有所變動），請根據(jù)寄送時長訂購足量干冰，用厚實的泡沫箱進行運輸。
2、充液法常溫運輸（T25瓶）
一般選擇生長良好的細胞，以生長60%~70%為宜，去掉舊培養(yǎng)液，補充新的培養(yǎng)液至瓶頸部，保留微量空氣，擰緊瓶蓋，并用封口膜密封，放在運送盒內(nèi)，用棉花等做防震防壓處理。常溫，到達目的地后倒出多余的培養(yǎng)液，只需保留維持生長所需的培養(yǎng)液置37℃培養(yǎng)，次日傳代。
提示：細胞寄送時，需告知細胞名稱、培養(yǎng)條件及凍存條件。
細胞流式檢測樣本采集要求
1、流式凋亡樣本送樣要求
【樣本收集】
貼壁細胞：
① 取出孔板（皿），小心收集上層清液于對應(yīng)編號的離心管中留用;
② 用不含EDTA胰酶消化，待細胞質(zhì)回縮，細胞之間不再連接成片，則終止消化；
③ 吸出懸液到離心管中（與同編號留用液體混合），離心收集細胞，加入適量無鈣PBS洗滌1次，離心收集細胞沉淀；
④ 在細胞沉淀中加入適量無鈣PBS重懸細胞，并將懸液轉(zhuǎn)移至1.5ml尖底EP管中，離心收集細胞沉淀，使用試劑盒自帶的binding buffer重懸，4℃運輸置實驗室（細胞量不低于1×10^5為宜）。
懸浮細胞：
① 取出孔板（皿），收集細胞懸液于對應(yīng)編號的離心管中留用；
② 離心收集細胞，加入適量無鈣PBS洗滌1次，離心收集細胞沉淀；
③ 在細胞沉淀中加入適量無鈣PBS重懸細胞，并將懸液轉(zhuǎn)移至1.5ml尖底EP管中；
④ 離心收集細胞沉淀，使用試劑盒自帶的binding buffer重懸，4℃運輸置實驗室（細胞量不低于1×10^5為宜）。
注意事項：
① 使用不含EDTA的胰酶消化收集細胞;
② 用無鈣PBS或者binding buffer（1x）重懸于1.5ml尖底EP管中（如果兩者均沒有，則用培養(yǎng)基重懸，送到本實驗室再進行洗滌與染色），4℃運輸置實驗室。細胞密度不低于1×10^5；
③ 樣本運輸至實驗室后，再行染色，若樣品本身帶熒光，請?zhí)崆案嬷?/span>
④ 公司常備試劑盒為：AnnexinV-APC/PI雙染細胞凋亡檢測試劑盒（凱基）;
⑤ 送樣前請至少提前一天預(yù)約，并告知相關(guān)信息（具體例數(shù)、檢測內(nèi)容、特殊要求等）。
2、流式ROS樣本送樣要求
貼壁細胞：
① 取出孔板（皿），用胰酶消化，待細胞質(zhì)回縮，細胞之間不再連接成片，則終止消化；
② 吸出懸液到離心管中，離心收集細胞，加入適量PBS洗滌1次，離心收集細胞沉淀；
③ 在細胞沉淀中加入適量PBS重懸細胞，并將懸液轉(zhuǎn)移至1.5ml尖底EP管中，離心收集細胞沉淀；
④ 使用4℃預(yù)冷PBS或者無血清培養(yǎng)基重懸，4℃運輸至實驗室（細胞量不低于1×10^6為宜）。
懸浮細胞：
① 取出孔板（皿），離心收集細胞，加入適量PBS洗滌1次，離心收集細胞沉淀；
② 在細胞沉淀中加入適量PBS重懸細胞，并將懸液轉(zhuǎn)移至1.5ml尖底EP管中，離心收集細胞沉淀；
③ 使用4℃預(yù)冷PBS或者無血清培養(yǎng)基重懸，4℃運輸至實驗室（細胞量不低于1×10^6為宜）。
注意事項：
① 用PBS重懸于1.5ml尖底EP管中（如果沒有，則用無血清培養(yǎng)基重懸，送到本實驗室再進行洗滌與染色），4℃運輸至實驗室。細胞密度不低于1×10^6；
② 樣本運輸至實驗室后，再行染色，若樣品本身帶熒光，請?zhí)崆案嬷?/span>
③ 公司常備試劑盒為：活性氧檢測試劑盒（碧云天）;
④ 送樣前請至少提前一天預(yù)約，并告知相關(guān)信息（具體例數(shù)、檢測內(nèi)容、特殊要求等）。
3、流式周期樣本送樣要求
貼壁細胞：
① 吸棄上層培養(yǎng)基，PBS洗滌細胞1次，吸棄液體；
② 胰酶消化，待細胞質(zhì)回縮，細胞之間不再連接成片，加入新鮮培養(yǎng)基終止消化并收集懸液于對應(yīng)編號離心管中，離心棄上清；
③ 加入適量PBS洗滌2次，離心收集細胞沉淀；
④ 用75％預(yù)冷乙醇重懸細胞，低溫運輸至實驗室（細胞量為1×10^6為宜）。
懸浮細胞：
① 收集細胞懸液于對應(yīng)編號的離心管中，離心收集細胞沉淀；
② 加入適量PBS洗滌2次，離心收集細胞沉淀；
③ 用75％預(yù)冷乙醇重懸細胞，低溫運輸至實驗室（細胞量為1×10^6為宜）。
注意事項：
① 周期細胞量為1×10^6為宜。采用尖底EP管/離心管，運輸樣本，可減少后期處理時樣本的損耗；
② 固定后的細胞，4℃可存放一周左右，-20℃可存放一個月左右。短時間內(nèi)不檢測的話，建議保證冰乙醇的最終濃度為50%左右，避免樣品粘度太高，影響后續(xù)實驗結(jié)果；
③ 外地送樣，可在加入75％預(yù)冷乙醇固定后，低溫（泡沫盒+冰袋）郵寄至公司；
④ 送樣前請至少提前一天預(yù)約，并告知相關(guān)信息（具體例數(shù)、檢測內(nèi)容、特殊要求等）。
4、流式JC-1樣本送樣要求
貼壁細胞：
① 取出孔板（皿），用胰酶消化，待細胞質(zhì)回縮，細胞之間不再連接成片，則終止消化；
② 吸出懸液到離心管中，離心收集細胞，加入適量PBS洗滌1次，離心收集細胞沉淀；
③ 在細胞沉淀中加入適量無鈣PBS重懸細胞，并將懸液轉(zhuǎn)移至1.5ml尖底EP管中，離心收集細胞沉淀；
④ 使用4℃預(yù)冷PBS或者無血清培養(yǎng)基重懸，4℃運輸至實驗室（細胞量不低于1×10^6為宜）。
懸浮細胞：
① 取出孔板（皿），離心收集細胞，加入適量PBS洗滌1次，離心收集細胞沉淀；
② 在細胞沉淀中加入適量PBS重懸細胞，并將懸液轉(zhuǎn)移至1.5ml尖底EP管中，離心收集細胞沉淀；
③ 使用4℃預(yù)冷PBS或者無血清培養(yǎng)基重懸，4℃運輸至實驗室（細胞量不低于1×10^6為宜）。
注意事項：
① 用PBS重懸于1.5ml尖底EP管中（如果沒有，則用無血清培養(yǎng)基重懸，送到本實驗室再進行洗滌與染色），4℃運輸至實驗室。細胞密度不低于1×10^6個/ml；
② 樣本運輸至實驗室后，再行染色，若樣品本身帶熒光，請?zhí)崆案嬷?/span>
③ 公司常備試劑盒為：線粒體膜電位檢測檢測試劑盒（碧云天）；
④ 送樣前請至少提前一天預(yù)約，并告知相關(guān)信息（具體例數(shù)、檢測內(nèi)容、特殊要求等）。
5、流式組織樣本送樣
將新鮮組織置于預(yù)冷PBS中，4℃運輸至實驗室。若樣品本身帶熒光，請?zhí)崆案嬷?/span>
6、流式血液樣本送樣要求
抗凝全血(大多數(shù)采用肝素鈉/EDTA抗凝)，采集后室溫保存，盡量2h內(nèi)送達實驗室。
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